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Medio nutritivo Agar alcalino descripción

Agar alcalino medio nutritivo- medio nutritivo denso para el aislamiento del vibrio del cólera.
La composición de alta calidad es bastante nutritiva y promueve la rápida formación de colonias de vibrio, mientras que el pirosulfito de sodio suprime parcialmente la microflora que la acompaña.
El factor selectivo es un nivel elevado de pH, que finalmente suprime el desarrollo de microorganismos extraños y no afecta el crecimiento del patógeno del cólera.

Medio nutritivo Agar alcalino especificaciones

El factor selectivo es un nivel elevado de pH, que finalmente suprime el desarrollo de microorganismos extraños y no afecta el crecimiento del patógeno del cólera.
El cultivo se realiza a 37°C durante 12-14 horas.

Composición del agar alcalino :
Hidrolizado pancreático de harina de pescado, peptona enzimática seca, extracto de levadura, glucosa, fosfato de sodio disustituido, cloruro de sodio, metabisulfito de sodio, carbonato de sodio, agar.

Preparación de Agar Alcalino:
El medicamento en la cantidad necesaria para preparar una serie específica de medio nutritivo se mezcla en 1 litro de agua destilada, se hierve hasta que el agar se derrita por completo, se filtra a través de un filtro de gasa de algodón, se vierte en viales y se esteriliza en autoclave durante 20 minutos a temperatura ambiente.
(121±1)°С.
El medio nutritivo listo es transparente, amarillo. Se permite una ligera opalescencia.
pH 8,0±0,2
El medio preparado se puede almacenar durante 10 a 14 días a una temperatura de 2 a 8 °C en un lugar protegido de la luz.

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Lista de documentación del equipo:

• Manual del operador
• Instrucciones de instalación
• Instrucciones de instalación y mantenimiento.
• Instrucciones de instalación y funcionamiento.
• Instrucción de ajuste
• Instrucciones de mantenimiento y reparación.
• Manual de entrenamiento
• Manual de usuario y servicio
• Manual de reparación (diagrama eléctrico)
• Instrucciones de mantenimiento
• Manual de instalación
• Manual de servicio e instalación.
• Instrucciones de uso y mantenimiento.
• Operación manual
• Procedimiento de verificación
• Esquema electrico
• Manual de usuario
• Instrucciones de reparación
• Catálogo (elementos, repuestos, etc.)
• Método de prueba
• Método de sintonización
• Método de cálculo
• Materiales metódicos
• Pasaporte
• Software
• Recomendaciones de reparación
• Guía del administrador
• Guía del operador
• Manejo y cuidado manual
• Manual de instalación
• Manual de instalación y mantenimiento
• Guía de usuario
• Manual de servicio
• Manual de referencia
• Documentación técnica (Documentación Técnica/Manual)
• Especificaciones
• Especificaciones
• Descripción técnica
• Manual técnico
• Documentación de funcionamiento y servicio.

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Es un polvo amarillo fino, higroscópico y sensible a la luz.

Un conjunto de reactivos debe garantizar el crecimiento de los sellos de prueba Vibrio cholerae cholerae 01 grupo P-1 (145), Vibrio cholerae eltor 01 grupo M-878 (890), Vibrio cholerae non 01 P-9741 cuando se inoculan con 0,1 ml de suspensión microbiana. de cada cepa de prueba después de 12 a 14 horas de incubación a una temperatura de 37°C en forma de colonias suaves y translúcidas con un tinte azulado a la luz transmitida. con un diámetro de al menos 1,0 mm.

Diseñado para aislar el microbio de la tos ferina de material infectado y cultivar cepas.

Compuesto: hidrolizado pancreático de caseína, cloruro de sodio, carbonato de sodio, fosfato disódico anhidro, extracto de levadura forrajera, agar microbiológico.

Cocinando: El medio nutritivo en la cantidad indicada en la etiqueta se mezcla bien en 1 litro de agua destilada, se hierve durante 2-3 minutos, revolviendo ocasionalmente, hasta que el agar se derrita por completo. Se filtra a través de un filtro de gasa de algodón, se vierte en viales y se esteriliza en autoclave durante 20 minutos a una temperatura de 120oC.

Agar sangre para la prueba CAMP. A agar nutritivo al 2%, pH 7,4-7,6, agregue 0,2% de glucosa y eritrocitos de oveja o ganado vacuno. Los eritrocitos de sangre citratada se lavan tres veces con una solución isotónica de cloruro de sodio para eliminar la antihemolisina que pueda contener el suero y luego se resuspenden en la misma solución hasta el volumen de sangre original. Agregue una suspensión de eritrocitos al 5% al ​​agar.

Bilis: agar alcalino (en adelante, ZhShA). Agar nutritivo seco - 35,0 g; autolisado de levadura - 20,0 ml; glucosa - 10,0 g; agua destilada - 600 ml. Se funde el agar, se filtra, se añade bilis de buey fresca (400,0 ml) y carbonato de sodio (5,0 g).

Esterilizar el medio preparado en autoclave a 112 0 C durante 15 minutos. Antes de verter en tazas, se añaden al medio 50,0 ml de sangre fresca (de oveja, conejo o humana), 12,5 ml de una solución de cristal violeta al 0,01% y 20 ml de una solución de hidróxido de potasio (en adelante KOH).

Leche con azul de metileno. La leche fresca se lleva a ebullición, se deja durante un día, se quita la nata, se vuelve a hervir, se deja nuevamente durante un día y se vuelve a quitar la capa superior. De esta manera, la leche desnatada se filtra a través de una gruesa capa de algodón, alcalinizada con una solución de carbonato de sodio al 10% a pH 7,2. A 100 ml de leche se añaden 2,0 ml de una solución acuosa al 1% de azul de metileno. El medio así preparado se vierte en tubos de ensayo esterilizados de 5,0 ml y se esteriliza con vapor durante 3 días durante 30 minutos.

Entorno de diagnóstico diferencial de enterococos (EDDS). Agar nutritivo seco - 35 g, autolisado de levadura para la preparación de medios nutritivos - 20 ml, glucosa - 10 g, agua destilada - 800 ml. Derretir cuando se calienta, se filtra, se esteriliza a 112 0 C en un autoclave durante 15 minutos, pH 7,2-7,4.

Antes de verter en tazas, se agrega TTX - 0,1 g al medio nutritivo; una solución acuosa de cristal violeta al 0,01% - 12,5 ml; ácido nalidíxico - 0,1 g; leche desnatada esterilizada, calentada a 44-45 0 С - 200 ml; Sangre fresca desfibrinada (animal o humana) - 50 ml. El contenido se agita bien y se vierte en tazas de 7 ml.

Agar nutritivo de levadura de azúcar con telurito potásico. Agar nutritivo seco - 35 g, autolisado de levadura - 20 ml, glucosa - 10 g, agua destilada - 1000 ml. La mezcla preparada se funde calentando, se añaden 5,0 g de citrato de sodio y el medio se esteriliza a 112 0 . C durante 15 minutos, pH 7,2-7,4. Antes de verter el medio en vasos esterilizados, agregue 50 ml de suero de caballo, 0,1 g de ácido nalidíxico y 0,7 g (35 ml de una solución acuosa al 2%) de telurito de potasio y mezcle bien.

Caldo nutritivo con glucosa. A 100 ml de caldo nutritivo, pH 7,2-7,4, añadir 0,2 g de glucosa.

El medio preparado se esteriliza fraccionariamente durante 3 días seguidos durante 20 minutos o una vez durante 15 minutos a 0,5 atm. en autoclave.

Agar sangre al 5%. A 100 ml de agar nutritivo al 2%, derretido y enfriado a 45 grados. C, pH 7,4-7,6, respetando las normas de asepsia, añadir 5 ml de sangre desfibrinada de oveja, caballo o conejo. La mezcla se mezcla bien y se vierte en tazas con una capa de 3-4 mm.

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Vitaminas en dosis prescritas con precisión. Los aminoácidos se utilizan como fuentes de nitrógeno. La ventaja de estos medios es que tienen una composición constante y pueden usarse para determinar las necesidades de los microbios de ciertos nutrientes.

Los medios nutritivos densos se preparan a partir de líquidos con la adición de un sellador. El agar-agar se suele utilizar como sellador. Agar-agar: un producto obtenido de algas, es un polvo o placas amarillentas, contiene polisacáridos de alto peso molecular, no es descompuesto por la mayoría de los microorganismos, no se destruye en autoclave, no cambia el valor nutricional del medio, no inhibe el crecimiento de microbios. Para los campos inmunológicos y bacteriológicos, se utiliza agar clarificado congelado, que se funde a una temperatura de 85-100 ° C cuando se hierve o se esteriliza en autoclave una mezcla de polvo con agua, y forma un gel cuando se enfría a 45-48 ° C.

Para la preparación de medios nutritivos densos, se añade agar-agar en una concentración del 1,5 al 3%.

Ambientes simples.

Caldo de carne y peptona (MPB) es la base proteica de todos los ambientes.

Hay varias formas de preparar MPB:

a) en agua con carne con la adición de peptona ya preparada: este es el llamado caldo de carne y peptona;

b) sobre la digestión de los productos de la hidrólisis de la materia prima con la ayuda de enzimas (tripsina - caldo de Hottinger, pepsina - caldo de Marten).

Son convenientes para el transporte, pueden almacenarse durante mucho tiempo, ahorran a los laboratorios el enorme proceso de preparación de los medios y acercan la cuestión de la estandarización de los medios a la resolución. La industria médica produce medios secos de Endo, Levin, Ploskirev, agar de sulfito de bismuto, agar nutritivo, carbohidratos con indicador de PA y otros.

termostatos

Los termostatos se utilizan para cultivar microorganismos.

Un termostato es un dispositivo que mantiene una temperatura constante. El dispositivo consta de un calentador, una cámara y paredes dobles entre las cuales circula aire o agua. La temperatura está regulada por un termorregulador. La temperatura óptima para la reproducción de la mayoría de los microorganismos es de 37°C.

Método de preparación de la placa de agar

El MPA se funde en un baño de agua y luego se enfría a 50-55°C. Se quema el cuello del vial a la llama de una lámpara de alcohol, se abren las placas de Petri para que entre el cuello de los viales, sin tocar los bordes de la placa, se vierten 10-15 ml de MPA, se cierra la tapa. agita el plato para que el medio se distribuya uniformemente, déjalo sobre una superficie horizontal hasta que solidifique. Después del secado, las placas con agar en placas se almacenan en frío.

Siembra en bucle

Se toma una gota de material con un asa enfriada esterilizada, se abre ligeramente un borde de la copa con la mano izquierda, se inserta un bucle en el interior y se hacen algunos trazos en el borde opuesto en un lugar, luego se arranca el bucle y el material se inocula con trazos paralelos de un borde de la copa a otro con un intervalo de 5-6 mm. Al comienzo de la siembra, cuando habrá muchos microbios en el bucle, darán un crecimiento confluente, pero con cada pasada de los microbios en el bucle, habrá cada vez menos microbios, permanecerán solitarios y darán colonias aisladas.

Siembra según el método Drygalski.

Este método se utiliza cuando se siembra material abundantemente sembrado con microflora (pus, heces, esputo). Para sembrar según el método Drygalsky, se toman una espátula y varias tazas (3-4). Espátula- Esta es una herramienta hecha de alambre de metal o dardo de vidrio, doblado en forma de triángulo o en forma de L. El material se introduce en la primera copa con un asa o pipeta y se distribuye uniformemente con una espátula sobre la superficie del medio, con la misma espátula, sin quemarla, se frota el material en el medio nutritivo en la segunda copa, y luego en el tercero. Con esta inoculación, la primera placa tendrá un crecimiento confluente y en las placas posteriores crecerán colonias aisladas.

Aislamiento de cultivo puro según Shchukevich

Para sembrar, tome un medio nutritivo recién preparado con condensado. El material de prueba se introduce con un asa y con cuidado, observando las reglas de asepsia, sin tocar el medio ni las paredes, en el agua de condensación. Las bacterias con alta motilidad "se arrastran" sobre la superficie húmeda del agar inclinado.

Como resultado Trabajo independiente el estudiante debe saber:

1. Clasificación, morfología de los hongos, sus métodos de estudio.

2. Clasificación y morfología de actinomicetos.

3. Reglas de regímenes antiepidémicos y precauciones de seguridad.

Ser capaz de:

1. Diferenciar microorganismos bajo microscopía.

2. Preparaciones teñidas microscópicamente.

3. Desinfectar el material, tratar las manos con desinfectantes.

4. Preparar preparaciones a partir de cultivos puros.